فایل word بررسی بیان ژن گیرنده اوپیوئیدی مو و اسپلایس واریانت های آن در لکوسیت های تک هسته ای خون محیطی افراد معتاد به اوپیوئیدها دارای 191 صفحه می باشد و دارای تنظیمات و فهرست کامل در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است
فایل ورد فایل word بررسی بیان ژن گیرنده اوپیوئیدی مو و اسپلایس واریانت های آن در لکوسیت های تک هسته ای خون محیطی افراد معتاد به اوپیوئیدها کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه و مراکز دولتی می باشد.
فهرست مطالب
عناوین
1- مقدمه
1-1- اوپیوئیدها-کلیات
1-1-2- مکانیسم های پیام رسانی اوپیوئیدها و پیام برهای ثانویه
1-1-2-1- مهار آدنیلیل سیکلاز
1-1-2-2-فعال سازی هدایت پتاسیم و مهار هدایت کلسیم
1-1-2-3- مهار رهایش ترانسمیترها
1-1-2-4- فعال کردن پروتئین کیناز C(PKC)
1-1-2-5- آزاد سازی کلسیم از ذخایر داخل سلولی
1-1-2-6- نشانه پردازی هسته ای
1-1-3- تغییرات تطابقی سلولی حاصل از مصرف مزمن مرفین
1-1-3-1- حساسیت زدایی (desensitization) حاد
1-1-3-2- اینترنالیزاسیون
1-1-3-3- حساسیت زدایی طولانی مدت و Down-Regulation
1-1-3-4- تغییرات تطابقی جبرانی
1-1-3-4-1- آدنیلیل سیکلاز
1-1-3-4-2- کانال پتاسیمی , کلسیمی و کاتیونی
1-1-3-4-3- انتقال سیناپسی
1-1-3-4-4- آدنوزین
1-2- نوروبیولوژی اعتیاد
1-2-1- منطقه VTA
1-2-1-1- تنظیم پیش سیناپسی رهایش گابا
1-2-1-2- تنظیم پیش سیناپسی رهایش گلوتامات
1-2-1-3- تجویز مزمن مرفین و تنظیم تحریک پذیری
1-2-1-4- تجویز مزمن مرفین و تغییرات جبرانی پس سیناپسی در سلول های دوپامینی
1-2-2- هسته اکومبنس
1-2-2-1- تاثیرات حاد مرفین در هسته اکومبنس
1-2-2-2- محرومیت از مصرف مزمن مرفین
1-2-3- سیستم های درگیر در جنبه های منفی اعتیاد به اوپیوئیدها
1-2-3-1- سیستم های نورآدرنرژیک
1-2-3-2- سیستم های نزولی درگیر در سندرم محرومیت از اوپیوئیدها
1-2-3-3- سیستم های حسی صعودی در محرومیت از اوپیوئیدها
1-3- اوپیوئیدها و سیستم ایمنی
1-3-1- شناسایی فارماکولوژیکی گیرنده های لوکوسیت ها
1-3-2- آثار اوپیوئیدها بر عملکرد سلول های فاگوسیتوز کننده
1-3-3- آثار اوپیوئیدها بر عملکرد سلول لنفوئیدی
1-3-4- آثار اوپیوئیدها بر تولید سایتوکاین
1-3-5- آثار اوپیوئیدها بر تیموس و طحال
1-3-6- اوپیوئیدها و مقاومت به بیماری های عفونی
1-4- فرضیه مارکر محیطی
1-5- متادون تراپی
1-6- گیرنده µ اوپیوئیدی و اسپلایس واریانت های آن
1-6-1- تعدد گیرنده های µ اوپیوئیدی - شواهد بالینی
1-6-2- تعدد گیرنده های µ - شواهد فارماکولوژیکی
1-6-3- تعدد گیرنده های µ اوپیوئیدی - بیولوژی ملکولی
1-6-4-Alternative Splicing
1-6-5- اسپلایس واریانت -MOR-1
2- مواد و روش ها
2-1- جامعه مورد مطالعه
2-2- تهیه نمونه خون
2-2-1- مواد و وسایل مورد نیاز
2-2-2- آماده سازی محلول EDTA ( M 5/0 , 8 = PH )
2-2-3- روش تهیه نمونه خون
2-3- انجام آزمون های هپاتیت B , هپاتیت C و ایدز
2-3-1- تشخیص هپاتیت C
2-3-2 تشخیص هپاتیت B
2-3-3- تشخیص ایدز
2-4- آزمایش ادرار جهت شناسایی وجود داروهای مخدر در آن
2-5- جدا کردن لنفوسیت ها از خون محیطی
2-5-1- مواد و وسایل مورد نیاز
2-5-2- آماده سازی محلول PBS 10X
2-5-3- روش جداسازی لنفوسیت ها
2-6- استخراج RNA
2-6-1- اجزای تشکیل دهنده کیت استخراج RNA و عملکرد آن ها
2-6-2- مراحل عملی استخراج
2-6-3- اندازه گیری غلظت RNA با استفاده از اسپکتروفتومتری
2-6-4- الکتروفورز نمونه های RNA
2-6-4-1- مواد و وسایل مورد نیاز
2-6-4-2- آماده سازی بافر TBE 5X
2-6-4-3- روش عملی کار
2-6-4-4- آشکارسازی ژل الکتروفورز
2-6-4-5- سنجش کیفیت RNA استخراج شده با استفاده از الکتروفورز
2-7- واکنش reverse transcription و سنتز cDNA – کلیات
2-7-1- اجزای کیت سنتز cDNA
2-7-2- روش عملی سنتز cDNA
2-8- Polymerase Chain Reaction (PCR) – کلیات
2-8-1- سیکل PCR
2-8-1-1- مرحله واسرشت (Denaturation)
2-8-1-2- اتصال (Annealing)
2-8-1-3- ساخت (Extension)
2-8-2- تعداد سیکل ها
2-8-3- طراحی پرایمر- کلیات
2-8-3-1- طراحی پرایمر با استفاده از نرم افزار
2-8-4-PCR اختصاصی برای ژن بتا اکتین
2-8-4-1- روش عملی کار
2-9- Real-time PCR – کلیات
2-9-1- استفاده از رنگ های متصل شونده به DNA یا Intercalating Dyes
2-9-2- پروب های هیدرولیز شونده
2-9-2-1- روش TaqMan 5´ Exonuclease Assay
2-9-2-2-Molecular Beacons
2-9-2-3- پروبهای عقربی (Scorpion)
2-9-3- پروب های هیبرید شونده (سیستم Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET))
2-9-4- تعاریف مهم در Real-Time PCR
2-9-5- بهینه سازی واکنش Real-time PCRبا استفاده از رنگ Sybr Green
2-9-6- آنالیز دادههای Real-time PCR
2-9-6-1- منحنی استاندارد
2-9-6-2- روش ارزیابی مطلق
2-9-6-3- روش ارزیابی نسبی
2-9-6-3-1- ارزیابی نسبی با استفاده از دو منحنی استاندارد
2-9-6-3-2- روش مقایسهای ΔΔCT
2-9-6-3-3- آنالیز سنجش کمی به روش پافل
2-9-7- مراحل عملی واکنش Real-time PCR
2-9-8- تعیین توالی محصولات Real-time PCR
2-10-کشت سلول
2-10-1- مواد و وسایل مورد نیاز
2-10-2- روش عملی کار
2-11- آنالیز داده ها
3- نتایج
3-1- استخراج RNA از لنفوسیت های جدا شده از خون
